两种瞬时表达体系研究拟南芥Profilin-1的亚细胞定位

• 作者: 张晓慧 韩榕
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 拟南芥 PRF1 瞬时表达 原生质体 GFP
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 57-62
• 页数: 6页
• 字数: 4839字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017.05.008

摘要

使用两种瞬时表达方法研究Profilin-1(PRF1)的亚细胞定位,并比较了2种瞬时表达体系在亚细胞定位研究中的优缺点.利用拟南芥幼叶作为材料,提取叶片的RNA,采用特异性引物RT-PCR的方法克隆PRF1基因,连接到pCAMBIA1300-GFP的改造载体上,成功的构建pCAMBIA1300-GFP-PRF1的表达载体.然后分别利用PEG转化拟南芥原生质体、农杆菌浸染烟草叶片两种技术进行了瞬时表达,并在激光共聚焦显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的表达.研究结果表明,将PRF1基因导入拟南芥的原生质体和烟草表皮细胞后,融合蛋白绿色荧光均能被观察到,PRF1基因与GFP融合蛋白的产物在烟草表皮细胞中主要定位在细胞质和外周细胞器中,在拟南芥的原生质体中的细胞核和细胞质中都有定位.两种不同的瞬时表达体系中PRF1蛋白的定位出现了不同,这可能与同源或异源表达的植物的特性相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩榕	山西师范大学生命科学学院植物分子与环境胁迫响应山西省高等学校重点实验室	94	716	14.0	21.0
2	张晓慧	山西师范大学生命科学学院植物分子与环境胁迫响应山西省高等学校重点实验室	2	5	1.0	2.0