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柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原-1潜在子孢子互作蛋白的筛选
柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原-1潜在子孢子互作蛋白的筛选
作者:
唐敏
崔晓霞
徐帅兵
朱顺海
杨志远
董辉
谢雨翔
赵其平
韩红玉
黄兵
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
柔嫩艾美耳球虫
顶膜抗原-1
GSTpull-down
相互作用蛋白
摘要:
为了筛选与柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原-1(Eimeria tenella apical membrance antigen 1,EtAMA1)存在互作的子孢子蛋白,以柔嫩艾美耳球虫子孢子cDNA为模板,PCR扩增EtAMA1基因胞外区,将扩增产物与pGEX-6P-1连接,构建原核表达质粒pGEX-6P-1-EtAMA1,表达、纯化重组蛋白EtAMA1-GST.纯化的重组蛋白经Western blot验证,结果显示在75 kDa处有单一的目的条带,证实了所获得的蛋白为EtAMA1-GST融合蛋白.将EtAMA1-GST蛋白、GST蛋白和PBS分别与谷胱甘肽琼脂糖珠孵育后,再分别与子孢子裂解物共孵育,洗脱液经SDS-PAGE分析后,结果显示三者之间的条带明显不同.将差异条带切下进行质谱分析,对获得的蛋白质肽段与Uniprot中鸡球虫蛋白质数据库进行Blast比对,初步获得了10个与EtAMA1存在潜在互作的柔嫩艾美耳球虫子孢子蛋白,包括微线体蛋白、糖酵解酶类、肌动蛋白相关因子以及一些保守蛋白等,他们广泛参与了虫体的入侵、发育、能量代谢等生物学过程.研究结果为进一步阐明EtAMA1在球虫入侵宿主细胞中发挥重要作用的分子机制奠定了基础.
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柔嫩艾美耳球虫
子孢子抗原
制备
内容分析
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文献信息
篇名
柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原-1潜在子孢子互作蛋白的筛选
来源期刊
中国动物传染病学报
学科
农学
关键词
柔嫩艾美耳球虫
顶膜抗原-1
GSTpull-down
相互作用蛋白
年,卷(期)
2017,(3)
所属期刊栏目
研究方向
页码范围
61-67
页数
7页
分类号
S852.723
字数
5245字
语种
中文
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顶膜抗原-1
GSTpull-down
相互作用蛋白
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国动物传染病学报
主办单位:
中国农业科学院上海兽医研究所
出版周期:
双月刊
ISSN:
1674-6422
CN:
31-2031/S
开本:
大16开
出版地:
上海市闵行区紫月路518号
邮发代号:
创刊时间:
1993
语种:
chi
出版文献量(篇)
2151
总下载数(次)
1
总被引数(次)
8579
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
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