摘要:
目的 体外实验探索骨水泥单体甲基丙烯酸甲酯(methyl methacrylate,MMA)对斯普拉格大鼠(Sprague Dawley,SD)乳鼠脊髓背根神经元的影响.方法 体外模拟椎体成形术制备骨水泥球,采用气相色谱法测定MMA单体释放的浓度范围及变化趋势;显微操作下提取乳鼠背根神经节并体外培养乳鼠脊髓背根神经细胞(dorsal root ganglion neurons,DRGs),用神经元特异性烯醇化酶(neuron specificity enolization enzymes,NSE)免疫荧光化学染色鉴定DRGs;根据体外实验模拟椎体成形术测得的MMA释放浓度范围,DRGs加入含有不同浓度MMA的培养基,设为正常对照组,10-3,10-2,10-1,1和10 g/L MMA组;采用台盼蓝染色法测定神经元存活率,采用Annexin V法进行流式细胞检测,分析MMA单体诱导的DRGs细胞凋亡情况.结果 骨水泥在植入后前10min内释放出大量单体,约占总释放量的90%以上,随着时间延长,单体释放总量基本保持平稳.60 min内MMA单体最大浓度范围为(0.1025±0.0068) g/L.DRGs加入MMA单体作用后,10-3和10-2 g/L组的细胞存活率分别为(95.00±2.24)%、(92.20±2.77)%,与对照组(97.00±1.87)%比较,差异无统计学意义(P值分别0.380和0.070);10-1、1、10 g/L细胞存活率分别为(89.40±5.18)%、(86.20±4.32)%、(77.60±3.78)%,与对照组比较,差异有统计学意义(P均<0.05).MMA单体诱导的DRGs的凋亡,MMA单体10-3、10-2、10-1、1、10 g/L均能够诱导细胞的凋亡,凋亡率分别为(38.3±2.2)%、(40.5±1.1)%、(44.1±3.5)%、(48.0±1.8)%、(54.8±2.7)%,与空白对照组凋亡率(22.6±5.0)%比较,差异有统计学意义(P均<0.05).结论 椎体成形术中存在MMA单体的释放,并且对椎体内感觉神经细胞存在毒性,因此MMA单体释放对椎体成形术的快速止痛有一定意义.