双齿围沙蚕抗凝血肽的制备及其抗血栓作用

• 作者: 丁国芳 余方苗 吴宗泽 杨最素 贾盈露 郑媛媛 陈锐
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 医学
• 关键词: 双齿围沙蚕 抗凝血肽 碱性蛋白酶 分离纯化 抗血栓
• 年，卷（期）: 2017,（23）
• 所属期刊栏目: 营养卫生
• 页码范围: 171-177
• 页数: 7页
• 分类号: R282.77
• 字数: 6482字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201723027

摘要

目的:探讨双齿围沙蚕抗凝血肽(anticoagulant peptides from Perinereis aibuhitensis,PAAP)的制备及其抗血栓作用.方法:以抗凝活力为检测指标,筛选最佳酶对沙蚕进行酶解.酶解产物经超滤、阴离子交换层析、凝胶过滤层析和反相高效液相色谱法分离纯化,得到具有最强抗凝活力的沙蚕寡肽,将此肽命名为PAAP并测定其急性毒性作用.采用角叉菜胶所致的小鼠尾部血栓形成实验、三氯化铁所致的大鼠动脉血栓形成实验及二磷酸腺苷(adenonisine disphosphate,ADP)诱导的血小板聚集实验,研究PAAP的抗血栓作用.结果:选取碱性蛋白酶作为最佳酶对沙蚕进行酶解,经过分离纯化后得到一条氨基酸序列:脯氨酸-缬氨酸-谷氨酸-精氨酸-赖氨酸(Pro-Val-Glu-Arg-Lys).经测定,该寡肽的体外抗凝活力可达(1320.0±20.3)U/g.PAAP的最大耐受量为11.0 g/(kg·d)且未出现小鼠异常及死亡现象,体内实验表明PAAP对小鼠尾部血栓的形成、大鼠动脉血栓的形成及ADP诱导的血小板聚集均有明显抑制作用.结论:从双齿围沙蚕中提取出的抗凝肽PAAP具有抗血栓作用.