油酸诱导建鲤(Cyprinus carpio var.Jian)肝细胞脂肪变性模型的建立

• 作者: 张春云 徐跑 曹丽萍 杜金梁 殷国俊 王涛 贾睿 顾郑琰 骆仁军
• 来源期刊: 渔业科学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 建鲤 肝细胞脂肪变性 油酸
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 107-113
• 页数: 7页
• 分类号: S942
• 字数: 5090字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11758/yykxjz.20160112001

摘要

通过对油酸诱导时间及有效作用浓度的研究,建立油酸致建鲤肝细胞脂肪变性模型.本研究以胰蛋白酶消化法获得的原代肝细胞作为实验材料,加入不同浓度油酸(0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 mmol/L)与肝细胞共培养24-48 h,诱导肝细胞脂肪变性,分别收集不同时段的肝细胞及上清液,采用试剂盒测定肝细胞中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)的含量,同时测定上清培养液中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,MTT法测定肝细胞的存活情况,确定油酸最佳诱导浓度,油红O染色法观察细胞内脂肪滴的形成情况.研究结果显示,0.4 mmol/L油酸与肝细胞共培养48 h,可以显著提高肝细胞内TG、TC含量(P＜ 0.05或P＜ 0.01),极显著提高上清培养液中GOT、GPT、LDH、γ-GT的活性,显著降低上清培养液中SOD的活性,但与24 h相比有升高趋势,0.4 mmol/L油酸与肝细胞共培养24 h,光镜下可见细胞内有脂肪滴形成,以48 h最明显.综上所述,油酸浓度0.4 mmol/L、诱导时间48 h成功构建了肝细胞脂肪变性模型,为研究鱼类脂肪肝类疾病奠定了基础.