摘要:
目的 研究白介素35(IL-35)蛋白在小鼠铜绿假单胞肺炎中的保护作用.方法 雄性健康清洁级昆明小鼠90只,随机分成正常对照组(生理盐水组:30只)、肺部感染组(PA组:30只)、干预组(30只).PA组:造模前12h自腹腔注射生理盐水1mL,戊巴比妥钠(50mg/kg)麻醉小鼠后固定,待麻药显效后,常规消毒铺巾,依次切开小鼠颈部皮肤、皮下、皮下组织,显露气管上段,从气管环状软骨间隙内穿刺注入铜绿假单胞菌(PA)菌液0、03mL(2个麦氏单位浓度即6× 108cfu/mL),以建立小鼠肺炎模型;干预组:在造模前12h自腹腔注射白介素35蛋白1mL(含白介素35蛋白2μg),肺炎模型建立同PA组;正常对照组:操作同前两组,在造模前12h自腹腔注射生理盐水1mL,最后从气管环状软骨间隙内穿刺注入生理盐水0.03mL作为正常对照.造模成功后,三组均在第3、9、24h随机抓取10只小鼠,留置标本后处死小鼠.取各个实验组在不同时间点小鼠右肺肺泡灌洗液,经离心后,用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbnent assay, ELISA)检测各组肺泡灌洗液中IL-17、IL-8的浓度;取左肺大部分肺组织经甲醛固定后,行HE染色比较肺炎炎症的范围和程度,取左肺小部分肺组织,用于制作肺组织匀浆并行细菌培养及菌落计数.结果 感染组、干预组小鼠肺组织在各个时间点存在明显的炎症改变,以24h组炎症改变最明显,但干预组在3、9、24h炎症改变明显轻于感染组,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);干预组各时间组IL-17,IL-8表达水平明显低于感染组,且差异有统计学意义(P<0.05).结论①IL-35对小鼠铜绿假单胞菌肺炎具有保护作用,可明显减轻其炎症反应.②IL-35减轻小鼠铜绿假单胞菌肺炎炎症反应可能与抑制炎性介质IL-8,IL-17有关.