小清蛋白中ErbB4免疫荧光染色条件的优化

• 作者: 侯筱宇 耿迟 陈幽婷
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: PV ErbB4 免疫荧光 后固定 抗原修复 一抗
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 开发与应用
• 页码范围: 586-591
• 页数: 6页
• 分类号: Q503
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2017.06.0094

摘要

[目的]探究免疫荧光标记小清蛋白(parvalbumin,PV)阳性神经元中ErbB4的最佳实验条件.[方法]小鼠海马组织,PV和ErbB4做免疫荧光染色,通过激光共聚焦观察多聚甲醛后固定时间、抗原修复和一抗孵育时间对PV和ErbB4免疫荧光检测效果的影响.[结果]多聚甲醛后固定不同时间(8h、48 h和240 h),一抗孵育40 h,结果显示,随着后固定时间的延长,PV和ErbB4的荧光强度和数量逐渐降低(P＜0.05).后固定240 h的脑组织,抗原修复后,PV和ErbB4荧光强度和数量显著升高(P＜0.05).一抗孵育12 h检测到PV和Erbb4荧光强度明显低于40 h(P＜0.05),ErbB4阳性神经元的数量低于40 h(P ＜0.05).[结论]pv阳性神经元中ErbB4的免疫荧光染色的最佳条件是后固定8h、一抗孵育40 h.对于多聚甲醛后固定较久的组织,抗原修复能够提高其染色效果.