茶树△12-脂肪酸去饱和酶基因FAD2和 FAD6的克隆与表达分析

• 作者: 俞滢 叶乃兴 岳川 王鹏杰 陈丹 陈桂信 陈静
• 来源期刊: 茶叶科学
• 学科: 工学
• 关键词: 茶树 △12-脂肪酸去饱和酶 非生物胁迫 基因表达
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 页码范围: 541-550
• 页数: 10页
• 分类号: TS272.5+1|Q946.84+1
• 字数: 6483字
• 语种: 中文

摘要

本研究在茶树转录组测序的基础上,以铁观音茶树的芽叶为材料,采用RT-PCR技术,克隆了茶树不饱和脂肪酸合成途径中的关键限速酶—△12-FAD(△12-脂肪酸去饱和酶)基因的包含完整ORF的cDNA序列(CsFAD2和CsFAD6).生物信息学分析结果表明,CsFAD2的全长为1184 bp,其开放阅读框(ORF)长度1149 bp,编码382个氨基酸,定位于内质网上,其氨基酸序列与油茶FAD2的同源性最高达97%;CsFAD6的全长为1425 bp,其ORF长度为1311 bp,编码436个氨基酸,定位于叶绿体上,其氨基酸序列与葡萄FAD6同源性达81%.荧光定量PCR结果表明,铁观音茶树幼苗在4℃低温胁迫处理72 h过程中,这两个基因的表达均受低温的诱导,其表达量随着处理时间的延长而升高,在处理48 h时,表达量水平最高;在100 g·L-1的PEG胁迫处理12 h过程中,这两个基因的表达均受PEG胁迫处理的诱导;在ABA(100μmol·L-1)胁迫处理72 h过程中,在处理6~24 h期间,CsFAD2的表达量显著升高,而CsFAD6的表达不受ABA处理的影响,CsFAD6的表达量在处理72 h时显著降低;在NaCl(250 mmol·L-1)胁迫72 h过程中,CsFAD2的表达量全程降低,而CsFAD6在处理24~72 h期间表达量显著升高.