靶向于TNF-α和RANKL的人源化抗体对DBA/1小鼠单关节炎的保护作用

• 作者: 娄苇苇 李慎涛 杜晓楠 窦云鹏 袁慧慧 赵文明
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 类风湿关节炎 肿瘤坏死因子α 核因子κB受体活化因子配体 人源化单克隆抗体(h8G12)
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 8-16
• 页数: 9页
• 分类号: R684.3|R392
• 字数: 6241字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13309/j.cnki.pmi.2017.02.002

摘要

目的 制备同时拮抗肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)和核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)的人源化单克隆抗体(h8G12),通过单关节炎小鼠模型,评估h8G12在抑制TNF-α引起的炎症反应和拮抗RANKL引起的骨破坏中的保护作用.方法 培养稳定表达h8G12的CHO细胞株,观察细胞生长状态,用间接ELISA检测细胞培养上清中h8G12的表达水平.纯化的h8G12经SDS-PAGE、Western blot分析及鉴定,用间接ELISA观察其亲和力.通过向DBA/1小鼠膝关节腔注射人TNF-α重组蛋白和人RANKL重组蛋白,建立单关节炎小鼠模型.用组织学评估观察不同给药方案[阴性对照组、阳性对照组、阿达木单抗(adalimumab,ADA)组和h8G12组]对小鼠单关节炎引起的炎症浸润、软骨侵蚀、膝关节腔内破骨细胞分化的保护作用.结果 CHO细胞株培养96 h时细胞生长状态良好,可稳定分泌h8G12;纯化的h8G12纯度可达90％,Western blot可见特异性条带,且可与rhTNF-α和rhRANKL结合.在单关节炎小鼠模型中,苏木精-伊红染色显示,h8G12组关节腔、周围软组织及骨髓腔内炎性细胞浸润明显少于阳性对照组,炎症评分降低了50％,治疗效果与ADA相似.甲苯胺蓝染色显示,h8G12组病理评分出现显著下降,h8G12治疗后小鼠关节结构相对完好,关节软骨厚度接近正常水平.抗酒石酸酸性磷酸酶染色显示,h8G12组关节腔内破骨细胞明显减少.结论 h8G12可有效抑制TNF-α引起的炎症反应和拮抗RANKL引起的骨破坏,为类风湿关节炎的治疗提供了新方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李慎涛	首都医科大学基础医学院免疫学系风湿免疫研究室	29	94	5.0	8.0
2	赵文明	首都医科大学基础医学院免疫学系风湿免疫研究室	45	291	11.0	15.0
3	袁慧慧	首都医科大学基础医学院免疫学系风湿免疫研究室	11	25	3.0	4.0
4	窦云鹏	首都医科大学基础医学院免疫学系风湿免疫研究室	2	3	1.0	1.0
5	杜晓楠	首都医科大学基础医学院免疫学系风湿免疫研究室	3	7	2.0	2.0
6	娄苇苇	首都医科大学基础医学院免疫学系风湿免疫研究室	1	3	1.0	1.0