Ⅱ型胶原诱导的关节炎大鼠滑膜成纤维细胞的培养、纯化和鉴定

• 作者: 仇海文 刘振州 刘梅 孙胜楠 李卉 马雪梅
• 来源期刊: 南京师大学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 滑膜成纤维细胞 胶原诱导的关节炎大鼠模型 原代培养 类风湿关节炎
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 128-132
• 页数: 5页
• 分类号: Q2-33
• 字数: 3474字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-4616.2017.03.019

摘要

类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)病人滑膜成纤维细胞(Fibroblast-like synoviocytes,FLS)是研究RA发病机制和进行RA药物筛选的最理想的细胞来源.但是对于众多非医疗机构的高校和科研院所而言,由于RA病人滑膜组织不易获取而难以进行细胞水平的操作.因此,建立胶原诱导的关节炎大鼠(Collagen-induced arthritis,CIA)模型,成功分离膝关节滑膜组织并进行滑膜成纤维细胞的原代培养和纯化,将有效解决RA FLS的来源问题,为后续实验奠定基础.本实验通过皮内和皮下两次注射鸡Ⅱ型胶原诱导Wistar大鼠罹患关节炎,通过关节炎指数评分和膝关节HE染色明确CIA模型的建立;分离膝关节滑膜组织,采用Ⅱ型胶原酶和无EDTA胰酶消化法分离细胞并进行传代培养,传至第三代时,细胞免疫荧光检测细胞中VCAM-1蛋白含量以鉴定细胞纯度.结果显示,滑膜组织经过消化和培养后得到大量大鼠滑膜成纤维细胞;在显微镜下观察所得细胞呈梭形树突状,具有成纤维样细胞特征;VCAM-1蛋白阳性细胞达98%以上,确证所分离细胞为滑膜成纤维样细胞,且纯度极高.本研究建立了较简便快捷地获得大量滑膜成纤维细胞的方法,为RA的发病机制研究和药物防治提供了丰富的实验材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘梅		5	3	1.0	1.0
2	仇海文	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	2	0	0.0	0.0
3	李卉	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	27	11	2.0	3.0
4	刘振州	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	1	0	0.0	0.0
5	孙胜楠	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	1	0	0.0	0.0
6	马雪梅	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	3	0	0.0	0.0