小鼠原代肝星状细胞的分离、鉴定及生物学功能分析

• 作者: 刘文鹏 叶棋浓 徐小洁 李佳睿 杜静华 梁吉光 韩聚强
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 肝星状细胞 原代培养 细胞分离 小鼠
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 600-603,708
• 页数: 5页
• 分类号: Q24
• 字数: 3296字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2017.05.005

摘要

目的:探索C57.BL/6J小鼠肝星状细胞(HSCs)分离、纯化的可行方案,并评价该法所得HSCs的生物学特性.方法:经肝门静脉,先用不合钙镁离子的D-Hanks液充分灌注肝脏,再以适宜浓度的链霉蛋白酶和Ⅳ型胶原酶顺序灌注,随后Percoll非连续密度梯度离心分离、纯化HSCs,台盼蓝拒染法检测HSCs活性,光镜观察体外培养的HSCs的形态学变化,免疫细胞化学鉴定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和结蛋白的表达,Western印迹检测α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白的表达.结果:纯化后每只小鼠获得HSCs约5.5×105个,纯度及存活率均大于95％;免疫细胞化学技术证实培养的HSCs分别表达α-SMA和结蛋白;Western印迹显示原代HSCs体外培养7d时,α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白的表达量达到峰值.结论:建立的分离、纯化方案可获得高纯度、高活率、功能正常的小鼠原代HSCs,为进一步研究肝纤维化的发病机制提供了技术保障.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩聚强	陆军总医院肝病科	10	20	3.0	3.0
3	李佳睿	吉林大学第一医院介入科	54	236	9.0	12.0
4	徐小洁	军事医学科学院生物工程研究所	51	112	6.0	7.0
5	刘文鹏	河北医科大学第三医院感染科	2	7	1.0	2.0
8	杜静华	河北医科大学第三医院中西医结合肝病科	3	13	2.0	3.0
9	梁吉光	吉林大学第一医院介入科	2	1	1.0	1.0