异源D-海因酶和N-氨甲酰水解酶共表达重组枯草芽孢杆菌的构建

• 作者: 刘露 王亚盟 班睿 申雨
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 枯草芽孢杆菌 D-海因酶 N-氨甲酰水解酶 全细胞催化剂 D-对羟基苯甘氨酸
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 54-65
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20160148

摘要

[目的]构建异源D-海因酶和N-氨甲酰水解酶共表达的重组枯草芽孢杆菌,探讨其作为全细胞催化剂合成D-对羟基苯甘氨酸的可行性.[方法]采用Paco表达盒表达D-海因酶基因hyd或sd1,采用PAE表达盒表达N-氨甲酰水解酶基因adc.分别以质粒pHP 13和pUB110为载体,构建D-海因酶和N-氨甲酰水解酶共表达质粒pHCS、pHCY和pUCS.在受体菌中整合表达了acoR和sigL基因,敲除了skf和sdp基因.将共表达质粒分别转化不同的受体菌,通过测定全细胞催化活性,表征D-海因酶和N-氨甲酰水解酶共表达的效果.[结果]带有质粒pHCY和pHCS的重组菌,全细胞催化活性分别为0.21 U/mL和0.31 U/mL.整合表达acoR和sigL基因以及高拷贝质粒pUCS,使全细胞催化活性达到1.0 U/mL.[结论]异源D-海因酶和N-氨甲酰水解酶在枯草芽孢杆菌中能够正确表达.基因拷贝数、acoR和sigL基因表达水平,及Skf和sdp基因缺失对重组菌的催化活性具有显著影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	班睿	天津大学化工学院系统生物工程教育部重点实验室	29	408	10.0	19.0
2	王亚盟	天津大学化工学院系统生物工程教育部重点实验室	1	2	1.0	1.0
3	刘露	天津大学化工学院系统生物工程教育部重点实验室	6	35	2.0	5.0
4	申雨	天津大学化工学院系统生物工程教育部重点实验室	1	2	1.0	1.0