H10亚型和N8亚型禽流感病毒双重RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 张艳芳 罗思思 范晴 谢丽基 谢志勤 谢芝勋 邓显文 黄娇玲 黄莉
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 H10亚型 N8亚型 双重RT-PCR
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 91-93
• 页数: 3页
• 分类号: S852.65
• 字数: 2104字
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中H10亚型和N8亚型禽流感病毒(AIV)的HA和NA基因保守序列,分别设计筛选出2对特异性引物,用于H10亚型和N8亚型AIV的检测,优化引物之间的浓度,建立了同时检测H10亚型和N8亚型AIV的双重RT-PCR检测方法.该方法对H10N8亚型AIV可特异性扩增出267 bp(H10亚型)和464 bp(N8亚型)目的条带,对H10Ny(y≠8)亚型AIV仅扩增出267 bp目的条带,对HxN8(x≠10)亚型AIV仅扩增出464 bp目的条带,对其他亚型AIV和常见禽病病原体均未扩增出任何条带.该方法对H10亚型和N8亚型AIV检测下限均为104拷贝数/μL.本研究建立的H10亚型和N8亚型AIV双重RT-PCR特异性强、灵敏度高,可同时快速检测H10亚型和N8亚型AIV,为其感染的快速鉴别诊断提供一种简便、快速和有效的方法.