Ras同源物基因家族成员B对肾透明细胞癌细胞生长及迁移能力的影响

• 作者: 关维民 刘萃龙 吴意光 周茂军 张新宇 徐衍盛 欧阳昀 王希友 王毅 赵豫波 陈伟浩
• 来源期刊: 转化医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Ras同源物基因家族成员B 肾透明细胞癌 细胞生长 迁移
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 80-83,87
• 页数: 5页
• 分类号: R737.11|Q51
• 字数: 3409字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-3097.2017.02.004

摘要

目的 研究干扰Ras同源物基因家族成员B(Ras homolog gene family member B,RhoB)表达后对肾透明细胞癌(renal clear cell carcinoma,RCCC)细胞生长及迁移能力的影响.方法 检测RhoB在RCCC细胞中的蛋白表达水平,采用脂质体转染方法转染RhoB真核表达载体pcDNA3.0-Flag-RhoB和沉默RhoB的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)即si-RhoB序列及相应空载体和对照序列,应用Western Blot法检测转染后RhoB的蛋白表达情况,通过3-(4,5-二甲基吡啶-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,MTS]法、平板克隆和Transwell小室细胞迁移实验检测细胞生长和细胞迁移能力的变化.结果 RhoB在RCCC细胞中表达降低.与转染空载体组比较,转染pcDNA3.0-Flag-RhoB重组质粒组RhoB的蛋白表达水平明显上调;与转染对照组比较,si-RhoB转染组RhoB的蛋白表达水平明显下调.在RCCC细胞786-O和Caki-1中,上调RhoB的表达后,在4、5、6 d经MTS法测定光密度值明显降低(P<0.05);在786-O细胞中上调RhoB表达后细胞克隆数明显减少;转染48 h后Transwell细胞迁移数明显减少(P<0.05).而下调RhoB表达后,细胞生长和Transwell细胞迁移数没有明显变化.在相对高表达RhoB的正常人肾小管上皮细胞中下调RhoB表达后细胞生长和细胞迁移数明显增多.结论 过表达RhoB后明显抑制RCCC细胞生长和迁移能力.