柑橘衰退病毒基因RNAi载体的构建

• 作者: 戴素明 李大志 李芳 赵亚 邓子牛
• 来源期刊: 湖南农业大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 柑橘 柑橘衰退病毒 RNAi载体 载体构建
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 生物科学与技术
• 页码范围: 140-144
• 页数: 5页
• 分类号: Q946.8
• 字数: 3320字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13331/j.cnki.jhau.2017.02.005

摘要

基于转化病毒基因介导抗性,通过在植物表达载体pCAMBIA 2301上插入启动子–内含子–终止子的方式,构建一种含有发夹结构的、通用型强的RNAi载体骨架结构;以柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)的p25、p20和p23基因保守序列为模板设计正向片段和反向片段,先后与骨架载体连接,成功构建了3个RNAi载体(分别命名为ds2301–p25、ds2301–p20和ds2301–p23),并将载体ds2301–p23注射入墨西哥莱蒙叶片.制作p23基因的地高辛标记探针,用Northern杂交检测是否有siRNA产生.结果表明:用Northern杂交可以检测到p23特异的siRNA,在墨西哥莱蒙叶片中瞬时表达的农杆菌ds2301–p23可以发生RNAi,表达有效的siRNA.本研究中构建的骨架载体可以广泛用于RNAi载体的构建,含有柑橘衰退病毒基因片段的3个载体可以用于基因功能分析及具有CTV抗性的柑橘种质资源获得.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李大志	湖南农业大学园艺园林学院	28	204	7.0	14.0
3	邓子牛	湖南农业大学园艺园林学院	78	668	15.0	22.0
5	李芳	湖南农业大学园艺园林学院	16	65	5.0	7.0
7	戴素明	湖南农业大学园艺园林学院	18	152	6.0	12.0
14	赵亚	湖南农业大学园艺园林学院	2	4	1.0	2.0