LAMP技术快速诊断布鲁氏菌病的研究

• 作者: 吴斌 姜红旭 孙浩 张琳 肇慧君 谢文萍
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 布鲁氏菌 16SrDNA 环介导等温扩增技术(LAMP)
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 186-192
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017.03.027

摘要

旨在应用环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)对布鲁氏菌进行研究.针对布鲁氏菌保守基因16S rDNA设计LAMP引物,通过浊度法对LAMP反应条件进行优化,应用建立好的LAMP反应条件进行特异性及灵敏性试验.结果显示:(1)优化后的反应条件是62℃恒温60 min,内引物1.50μmol/μL、外引物0.20μmol/μL、环引物1.0μmol/μL.(2)该LAMP方法与3株布鲁氏菌均发生了扩增反应,达到阳性浊度值,而与小肠耶尔森(ATCC9510)、大肠杆菌(ATCC25922)、沙门氏菌(ATCC10708)和金黄色葡萄球菌(ACTT33591)等标准菌株没有扩增反应.(3)浊度法和实时荧光法两种方法的检测最低限分别为4.36 fg/μL和436 fg/μL,其灵敏度均高于普通PCR的最低检出值4.36 pg/μL.LAMP检测技术用于布病临床诊断具有快速、高效、便捷等特点,对于基层布病的病原学诊断具有实用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴斌		59	317	10.0	15.0
2	肇慧君		20	52	4.0	6.0
3	孙浩		38	207	8.0	11.0
4	张琳		13	80	4.0	8.0
5	姜红旭		4	6	1.0	2.0
6	谢文萍		1	6	1.0	1.0