检测猪流行性腹泻病毒S1蛋白抗体的间接ELISA方法

• 作者: 姚作俊 宋勤叶 李潭清 王海敏 白云 郝达仁 颜国华
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流行性腹泻病毒 重组PEDV S1蛋白 间接ELISA 初生仔猪 母源抗体
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1085-1091
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 5685字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2017.06.013

摘要

为了建立检测猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)抗体的间接ELISA方法,初步分析PED灭活疫苗免疫母猪所产仔猪的血清母源特异抗体动态,笔者应用重组PEDV部分纤突(spike,S)蛋白作为检测抗原,建立了基于PEDV S1蛋白的间接ELISA抗体检测方法,并用该方法检测了产前4周用PED灭活疫苗免疫母猪的初乳、分娩当天血清及其仔猪1、7、14、21、28和35日龄(d)时血清中的PEDV抗体.结果显示:建立的间接ELISA方法能够特异地检测PEDV抗体,与猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒及猪轮状病毒的抗血清无交叉反应;敏感性高于免疫过氧化物酶单层试验(immunoperoxidase monolayer assay,IPMA),与IPMA检测结果的符合率为97.14％;批内和批间重复性试验的变异系数小于10％.免疫母猪初乳、分娩当天血清中的PEDV抗体阳性率为100％,初乳比血清中的平均抗体水平低;1d仔猪血清PEDV抗体阳性率为50％,平均抗体水平低,与初乳中的抗体水平接近,7d以后所有仔猪血清全部转为PEDV抗体阴性.建立了检测PEDV抗体的间接ELISA方法;产前用PEDV灭活疫苗给怀孕母猪免疫1次时,其所产仔猪血清中的母源特异抗体阳性率和抗体水平低,且维持时间短暂.