密码子优化提高猪IL-7在HEK293T细胞表达的研究

• 作者: 仲飞 崔丹 左玉柱 张建楼 温洁霞 霍珊珊
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: 猪白细胞介素-7 密码子优化 表达 真核细胞
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 页码范围: 88-92
• 页数: 5页
• 分类号: S828
• 语种: 中文
• DOI: 10.13320/j.cnki.jauh.2017.0131

摘要

为提高重组猪白细胞介素-7(pIL-7)在人胚胎肾细胞(HEK293T)中的表达,依据人偏爱的密码子对pIL-7基因进行了优化修饰,然后用pcDNA3.1A质粒构建其与Myc/His-标签融合的真核表达载体.将此表达载体和过去构建的野生型pIL-7表达载体分别转染HEK293T细胞进行表达,利用镍-琼脂糖凝胶颗粒从培养基中纯化表达的重组pIL-7,比较二者的表达水平.结果显示,密码子优化后pIL-7基因在HEK293T细胞中的表达水平为(45±3.2) μg/T25细胞瓶,比野生型pIL-7基因的表达水平(21±1.8) μg/T25细胞瓶,提高了2倍多,可见密码子优化可明显提高重组pIL-7在HEK293T细胞中的表达.这为猪IL-7的生物学功能的研究提供了必要条件.