莱茵衣藻“细菌型”pepc2基因叶绿体表达及其对油脂蛋白质含量的影响

• 作者: 何培民 冯思豫 施定基 朱嘉诚 米华玲 贾晓会 贾睿
• 来源期刊: 上海海洋大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 莱茵衣藻 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC) 叶绿体表达 RT-qPCR 脂肪酸 蛋白质
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 水产生物技术
• 页码范围: 641-650
• 页数: 10页
• 分类号: Q785
• 字数: 6002字
• 语种: 中文
• DOI: 10.12024/jsou.20161201915

摘要

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(Phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPC,EC 4.1.1.31)在植物碳代谢中有重要作用,高等植物中PEPC可以调控蛋白质和脂肪酸含量,但是对绿藻PEPC的研究还较少.莱茵衣藻是绿藻中的模式生物,其基因工程中外源基因的转化以叶绿体转化效率最高,为了提高外源蛋白表达和获得高产油莱茵衣藻,利用叶绿体转化法能进一步提高表达效率.因此,本研究首先克隆了莱茵衣藻“细菌型”PEPCCS Ⅰ (conserved sequence Ⅰ)的639 bp,构建了pASapI-reve-Crpepc2和pASapI-forw-Crpepc2正反向叶绿体表达载体,并用基因枪法转化莱茵衣藻cc-400获得了空质粒型,正向型和反向型转基因藻株.其次,应用RT-qPCR方法检测Crpepc2的相对表达量,结果表明反向型Crpepc2的表达量减少了89.97％,而正向型增加了201.16％.最后,检测了总蛋白和脂质含量的变化,正向型突变株的总蛋白增加了37.03％;而反向型突变株的脂质含量增加了70.32％,且不饱和脂肪酸含量明显增加.以上结果证明莱茵衣藻“细菌型”PEPC的叶绿体表达不仅可以进一步提高蛋白质与脂肪酸含量,也可为今后外源蛋白的表达和高产油工程藻的应用做贡献.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何培民	上海海洋大学水产与生命学院	140	911	16.0	21.0
2	施定基	上海海洋大学水产与生命学院	66	1027	18.0	28.0
4	米华玲	中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所	13	85	5.0	9.0
5	贾睿	上海海洋大学水产与生命学院	30	91	5.0	8.0
6	冯思豫	上海海洋大学水产与生命学院	3	1	1.0	1.0
9	贾晓会	上海海洋大学水产与生命学院	6	28	3.0	5.0
10	朱嘉诚	上海海洋大学水产与生命学院	2	1	1.0	1.0