血小板裂解液联合国产多孔钽对MG63细胞增殖以及ITGβ1/Vinculin/F-actin信号通路表达的影响

• 作者: 孙福斋 李琪佳 王少华 王志强 王茜 甘洪全 邓华民
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 生物材料 骨生物材料 血小板裂解液 多孔钽 MG63细胞 整合素 黏着斑蛋白 束状肌动蛋白
• 年，卷（期）: 2017,（34）
• 所属期刊栏目: 组织工程骨材料
• 页码范围: 5430-5436
• 页数: 7页
• 分类号: R318
• 字数: 8071字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.34.004

摘要

背景:课题组前期研究发现国产多孔钽有利于MG63细胞的早期黏附、增殖,可用作骨组织工程支架材料.血小板裂解液是富血小板血浆进一步优化后的产物,更适合用于诱导修复骨缺损.目的:在前期研究基础上,深入探索血小板裂解液联合国产多孔钽支架材料对MG63细胞增殖以及ITGβ1/Vinculin/F-actin信号通路表达的影响.方法:培养MG63细胞并接种在国产多孔钽支架上,加入3%、5%、7%、10%血小板裂解液,应用CCK-8法筛选出最佳的体积分数7%进行以下实验.实验分组:空白对照组MG63细胞培养;血小板裂解液组:7%血小板裂解液与MG63细胞共同培养;多孔钽组:多孔钽支架材料与MG63细胞共同培养;血小板裂解液-多孔钽组:7%血小板裂解液、多孔钽与 MG63细胞共同培养.扫描电镜观察国产多孔钽及血小板裂解液-多孔钽-MG63细胞复合物的表面形态;CCK-8法检测MG63细胞的增殖状态;qPCR、免疫细胞化学染色、Western-blot检测MG63细胞ITGβ1、Vinculin、F-actin的mRNA和蛋白表达.结果与结论:①扫描电镜显示,MG63细胞均良好地黏附在多孔钽支架表面;②与空白对照组比较,血小板裂解液组与多孔钽组均可促进MG63细胞的增殖(P < 0.05);4组中,血小板裂解液-多孔钽组MG63细胞的增殖最显著(P < 0.05);③qPCR、免疫细胞化学染色、Western-blot结果显示,4组中血小板裂解液-多孔钽组MG63细胞的ITGβ1、Vinculin、F-actin的mRNA及蛋白表达最多(P < 0.05).说明血小板裂解液和国产多孔钽支架材料能协同促进MG63 细胞的增殖,并能上调ITGβ1/Vinculin/F-actin信号通路mRNA及蛋白的表达,该信号通路的激活可能有助于MG63细胞的增殖、黏附及分化.