半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)c-Jun基因的克隆及免疫应答分析

• 作者: 于孟君 仇雪梅 刘洋 孙璐明 杨光 沙珍霞 陈亚东 陈学杰
• 来源期刊: 渔业科学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 半滑舌鳎 转录因子c-Jun基因克隆 表达分析 病原感染 免疫应答
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 31-39
• 页数: 9页
• 分类号: Q522
• 字数: 5001字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11758/yykxjz.20160125001

摘要

半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)AP-1家族转录因子c-Jun基因(Jun proto-oncogene)及其在免疫应答中的作用尚无报道.本研究根据半滑舌鳎转录组数据库中预测的c-Jun序列,通过RACE技术和PCR扩增方法获得了半滑舌鳎c-Jun基因cDNA全长2093 bp,CDS区域共981 bp,编码326个氨基酸,5'UTR区域377 bp,3'UTR区域735 bp.SMART分析显示,C-JUN蛋白具有2个结构域:AP-1家族典型结构域Jun,以及高度保守的亮氨酸拉链结构域(BRLZ).经蛋白多序列同源比对、系统进化树分析,发现半滑舌鳎c-Jun与虹鳟(Oncorhynchus mykiss)c-Jun亲缘关系最近.实时荧光定量PCR分析显示,c-Jun基因在半滑舌鳎不同组织中普遍表达,在卵巢中表达量最高.鳗弧菌(Vibrio anguillarum)人工感染半滑舌鳎后,c-Jun基因在肝脏、脾脏、头肾、小肠、鳃、血液中表达量都出现不同程度上调,其中,鳃中变化最明显:感染12h后表达量达到0h时的13.20倍.使用LPS、PGN、PolyI:C和WGP病原模拟物刺激半滑舌鳎外周血淋巴细胞,结果显示,WGP诱导c-Jun基因上调表达,而LPS与PolyI:C均下调基因表达.以上实验结果表明,c-Jun基因在半滑舌鳎的免疫防御中发挥重要作用.