表皮黑素细胞的纯化

• 作者: 张汝芝 李娣
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 黑素细胞 细胞培养技术 纯化 包被材料
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 细胞与分子生物学
• 页码范围: 5-8
• 页数: 4页
• 分类号: R751
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/20161212

摘要

目的：比较不同包被材料、不同培养条件对黑素细胞的纯化作用。方法将包皮组织、包皮的表皮组织及消化所得的细胞悬液，分别培养于层黏连蛋白或基质胶包被的培养板中，传代时进行差别胰酶处理、80%～90%融合时加入G418（0.05%）4 min或5-BrdU，通过黑素细胞的标记性抗体HMB-45荧光染色，观察黑素细胞纯度。结果原代培养中，细胞悬液比组织块获得细胞更多更快，单纯表皮比带真皮的组织块更早有细胞迁移并增殖；层黏连蛋白包被比基质胶包被更有利于黑素细胞生长；差别胰酶处理以及加入一定浓度的G418或5-BrdU均可纯化黑素细胞，但G418、5-BrdU浓度较大时对细胞损伤明显。结论采用层黏连蛋白包被板培养包皮来源的细胞悬液，传代时采用差别胰酶处理，传代后加小剂量的G418，有利于黑素细胞纯化，而不影响其生长。