沉默pim-3基因对黑色素瘤细胞B16的抑制作用

• 作者: 于馨 刘静 张彩 胡渊
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 黑色素瘤 pim-3基因 B16细胞 凋亡 增殖 侵袭
• 年，卷（期）: 2017,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1063-1069
• 页数: 7页
• 分类号: R739.5|R730.54
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385x.2017.10.004

摘要

目的:观察靶向沉默原癌基因pim-3对小鼠黑色素瘤细胞B16的抑制作用.方法:用脂质体将特异性靶向沉默pim-3载体(pim-3-shRNA)和pin-3过表达载体(pim-3-MIGR1)转染到黑色素瘤细胞B16中,荧光定量PCR和Western blotting法检测pim-3 mRNA和蛋白表达的变化,Annexin V/PI染色和TUNEL染色检测细胞凋亡情况,荧光定量PCR和Western blotting法检测p-Bad、Bcl-2、Bcl-xl、Bax、caspase-3等凋亡相关分子表达的变化,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,RTCAxCELLigence系统检测细胞迁移情况,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭的变化.结果:转染pim-3-shRNA组B16细胞的pim-3mRNA及蛋白表达较对照组明显下降(P＜0.05),转染pim-3过表达质粒组B16细胞的pim-3 mRNA及蛋白表达较对照组显著增加(P＜0.05).转染pim-3-shRNA后,B16细胞的凋亡明显增加,在此基础上共转pim-3过表达质粒后则明显逆转沉默pim-3所引起的凋亡(p＜0.05);进一步检测发现沉默pim-3明显下调凋亡相关分子p-Bad、Bcl-2、Bcl-xl的表达,上调Bax的表达,最终引起caspase-3活性增加(P＜0.05).沉默pim-3后B16细胞增殖和迁移受到抑制(P.＜0.05),而细胞周期无明显变化.结论:靶向沉默pim3基因能促进黑色素瘤细胞的凋亡,抑制细胞的增殖和迁移,提示pim-3基因可以作为黑色素瘤基因治疗的新靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘静	山东大学药学院免疫药理和免疫治疗研究所	88	896	18.0	26.0
2	张彩	山东大学药学院免疫药理和免疫治疗研究所	27	123	6.0	10.0
3	胡渊	山东大学药学院免疫药理和免疫治疗研究所	4	8	1.0	2.0
4	于馨	山东大学药学院免疫药理和免疫治疗研究所	3	1	1.0	1.0