利用qPCR法检测OsPIMT1转基因水稻中的外源片段拷贝数

• 作者: 何炜 吴方喜 张建福 林悦龙 罗曦 谢华安 连玲 魏毅东
• 来源期刊: 福建稻麦科技
• 学科: 农学
• 关键词: 水稻 转基因 草铵膦抗性基因(bar) 甘油醛-3-磷酸脱氢酶GAPDH2 实时定量PCR 拷贝数
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 基础理论
• 页码范围: 39-42
• 页数: 4页
• 分类号: S511|Q78
• 字数: 2589字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-9799.2017.04.013

摘要

水稻转化过程中,多个拷贝数整合到基因组中影响遗传稳定性和基因表达.传统的Southern杂交检测法鉴定费时费力,不适合目前高通量和自动化的检测要求.因此研究通过比较定量除草剂草铵膦抗性基因(bar)和甘油醛-3-磷酸脱氢酶GAPDH2,建立了基于实时荧光定量PCR的拷贝数检测法.利用此体系对9个独立的异天冬氨酸甲基转移酶OsPIMT1转基因T0代植株进行了荧光定量分析,其中6个为单拷贝,3个为双拷贝,经过Southern杂交和分离比分析验证,表明该方法能够快速,准确的鉴定水稻含有草铵膦抗性基因的水稻转基因植株.