CFSE法检测刺激剂对淋巴细胞增殖与活化

• 作者: 来芳芳 董凯 薛妮娜 陈晓光 黄蕊
• 来源期刊: 哈尔滨商业大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 淋巴细胞增殖 CFSE 干扰素γ 流式细胞术
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 制药工程
• 页码范围: 129-134
• 页数: 6页
• 分类号: R446
• 字数: 2978字
• 语种: 中文

摘要

研究不同刺激剂对人外周血淋巴细胞增殖与活化的影响.采用密度离心法分离人外周血淋巴细胞,并采用1μmol/L 的CFSE进行标记,通过流式细胞术技术检测刺激剂抗CD3/28抗体、植物血凝素(PHA)和佛波酯(PMA)培养72 h对淋巴细胞分裂与增殖的影响.并采用ELISA法检测不同刺激剂对淋巴细胞上清IFNγ质量浓度的影响.0.125 μg/mL的抗CD3/28抗体和5或10 μg/mL的PHA可以显著诱导CFSE绿色荧光逐渐递,形成类似"五指峰"样图谱,说明这两者具有很强的诱导淋巴细胞分裂与增殖的作用.相比之下,单用PMA促进淋巴细胞分裂与增殖的作用较弱.此外,抗CD3/28抗体、PHA和PMA均可增加淋巴细胞IFNγ的分泌,但其作用强度如下:抗CD3/28抗体>PHA>PMA.采用CFSE标记法检测淋巴细胞增殖的实验,得出抗CD3/28抗体和PHA是高效的淋巴细胞活化刺激剂,而且最佳质量浓度分别为0.125 μg/mL和10 μg/mL.