血液总DNA提取方法的优化

• 作者: 吾热力哈孜·哈孜汗 张健 李书阳 李新程 王媛 王琦 王远志 肖巧玲 邢建新 高琪琛
• 来源期刊: 农垦医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 血液总DNA 蛋白酶K DNA提取基因组
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 基础与临床医学
• 页码范围: 197-200
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2198字
• 语种: 中文

摘要

目的:比较不同蛋白酶K浓度对血液总DNA浓度和纯度提取的影响作用.方法:随机抽取22份新疆建设兵团第三师51团全民体检血液样本,以TIANGEN生化科技(北京)有限公司血液提取试剂盒(离心柱型)为基础,分析11种不同蛋白酶K浓度(18.0,18.4,18.6,18.8,18.9,19.0,19.1,19.2,19.4,19.6,20.0mg/mL)对250μL血液总DNA浓度和纯度提取的影响.结果:(1)在蛋白酶K浓度在18.0～20.0mg/mL范围时,随着蛋白酶K浓度的增加,所提取的DNA浓度在19.0mg/mL时达到最大,当继续增加蛋白酶K浓度时,DNA浓度呈明显下降趋势;(2)随着蛋白酶K浓度的增加,OD260/OD280在18.6mg/mL时达到最大,且继续增加蛋白酶K浓度,OD260/OD280呈缓慢下降趋势;(3)蛋白酶K浓度在18.8～19.0mg/mL时,所提取的DNA浓度和纯度最佳.结论:建议TIANGEN生化科技(北京)有限公司在提取250μL人血液样本时选择蛋白酶K浓度应为18.8～19.0mg/mL,既能提高血液核酸DNA的提取质量,又可降低提取人血液DNA的成本.