CDV、CPV、CAV-2及CPIV 多重PCR的建立及应用

• 作者: 刘存 刘琪 刘畅 崔尚金 梁琳 王静 袁维峰 逄春华 钱爱东
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 多重PCR 犬瘟热病毒 犬细小病毒 犬腺病毒Ⅱ型 犬副流感病毒
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 89-93
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3421字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.11.024

摘要

为建立一种快速检测犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒Ⅱ型(CAV-2)和犬副流感病毒(CPIV)的多重PCR方法,参照GenBank中的相关病毒基因序列,分别设计了4对引物,用于特异性扩增CDV H基因、CPV VP2基因、CAV-2 E3基因和CPIV NP基因上的目的片段.通过优化反应条件,建立了同时扩增CDV(410 bp)、CPV(253 bp)、CVA-2(655 bp)和CPIV(868 bp)的多重PCR方法.利用建立的多重PCR方法,对CDV、CPV、CAV-2、CPIV、CDV+CPV+CAV-2+CPIV和犬冠状病毒(CCV)的DNA或cDNA模板进行扩增,发现该方法的特异性良好.利用建立的多重PCR方法与单一PCR方法进行敏感性比较,发现两者敏感性相差10倍,证明多重PCR方法敏感性良好.利用该方法对从北京市采集的30份犬病料样品进行检测,发现CDV阳性率为63.33%(19/30)、CPV阳性率为33.33%(10/30)、CAV-2阳性率为6.66%(2/30)、CPIV阳性率为0(0/30).检测结果证明建立的多重PCR方法可用于临床诊断.