HPLC法同时测定大鼠血浆中3种CYP 450探针药物的浓度

• 作者: 周芳 李思聪 李旭廷 杨锐 王斌 袁定胜
• 来源期刊: 中国兽药杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 细胞色素P450 高效液相色谱法 非那西丁 甲苯磺丁脲 咪达唑仑
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 检验与检测
• 页码范围: 23-29
• 页数: 7页
• 分类号: S
• 字数: 3789字
• 语种: 中文

摘要

建立了同时测定大鼠血浆中3种细胞色素P450(CYP450)亚型酶(CYP1A2、CYP2C9、CYP3A4)活性的Cocktail探针药物的高效液相色谱(HPLC)检测方法.分别取非那西丁,咪达唑仑和甲苯磺丁脲三种探针药物,制成混合探针溶液,用一种提取溶剂系统对3种探针药物同时提取,并用高效液相色谱法同时测定该3种探针药物的血药浓度,并对其进行专属性、线性范围及检测限、精密度、回收率、稳定性的验证.色谱条件选用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为甲醇-50 mM磷酸盐缓冲对(45∶55;pH 3.2);检测波长230 nm;流速1.0 mL/min;柱温35 ℃.结果表明:非那西丁,咪达唑仑,甲苯磺丁脲的线性范围分别为0.10～10.0 μg/mL(r=0.9993),0.05～5.0 μg/mL(r=0.9999),0.10～50.0 μg/mL(r=0.9991);方法回收率分别为79.28 ％～87.91 ％,76.43 ％～85.36 ％,82.79 ％～90.61 ％.该HPLC检测方法快捷,准确,灵敏度高,可以在同一次试验中,同时测定大鼠血浆中3种CYP450亚酶探针药物(非那西丁,甲苯磺丁脲,咪达唑仑)的浓度,各探针药物的吸收峰分离完全,无干扰,可用于开展某些受试药物对大鼠CYP450的3个主要亚型酶(CYP1A2,CYP2C9,CYP3A4)调控作用的相关研究,从而为相关肝药酶代谢研究提供方法学参考.