胆管癌全抗原致敏树突状细胞和细胞因子诱导杀伤细胞共培养体外抑瘤活性研究

• 作者: 刘颂航 卢海武 张大伟 温子龙 蒋小峰 薛平 袁晓鹏 郑强
• 来源期刊: 中华普通外科学文献（电子版）
• 关键词: 胆管肿瘤 树突细胞 细胞因子诱导杀伤细胞 肿瘤抑制
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 217-221
• 页数: 5页
• 字数: 4224字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-0793.2017.04.001

摘要

目的 通过胆管癌全抗原致敏树突状细胞(DC)联合细胞因子诱导杀伤细胞(CIK),探讨DC-CIK细胞的形态改变及增殖情况,检测抗原致敏DC-CIK细胞的抗肿瘤活性.方法 分离人外周血单个核细胞(PBMC)后取贴壁细胞作为前体DC,悬浮细胞用于CIK培养;经rhGM-CSF、rhIL-4、rhTNF-α诱导DC成熟;成熟DC中加入胆管癌细胞株RBE肿瘤抗原进行致敏,作为抗原致敏DC组;经rhIL-2、IL-1β诱导CIK成熟;按DC CIK=110、120、140的比例进行混合培养;流式细胞术检测DC表面标记(CD86、CD83、CD40、HLA-DR、CD1α、CD80);流式细胞术检测CIK、未致敏DC-CIK、致敏DC-CIK共培养细胞表面标记(CD3、CD8、CD56);采用萤火虫萤光素酶法检测CIK、未致敏DC-CIK、致敏DC-CIK抑瘤率;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法对细胞因子IL-12、IFN-γ的表达水平进行检测.结果 DC-CIK细胞共培养,流式细胞学技术检测表型发现抗原致敏DC-CIK组的CD3+CD8+和CD3+CD56+细胞亚型表达均为最高,其次为未致敏DC-CIK组,最低为CIK组.效靶比为201和401时,致敏DC-CIK组的抑瘤率明显高于未致敏DC-CIK组和CIK组(P<0.05),而效靶比为101时,CIK组、未致敏DC-CIK组、致敏DC-CIK组的抑瘤率差异无统计学意义.抗原致敏DC较抗原未致敏DC及诱导前DC细胞状态好,生长增殖迅速.在抗原致敏后,致敏DC-CIK组的细胞因子IL-12、IFN-γ表达水平明显高于未致敏DC-CIK组和CIK组(P<0.05).结论 体外异体胆管癌全抗原可有效致敏健康人体DC细胞分化成熟,表型及增殖能力提高.使用体外致敏DC-CIK共培养作为效应细胞,具有较高的增殖率,在效靶比相同的情况下,抗原致敏DC-CIK对RBE有更强的杀伤性活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑强	510260广州医科大学附属第二医院肝胆胰外科	4	17	2.0	4.0
2	温子龙	510260广州医科大学附属第二医院肝胆胰外科	4	17	2.0	4.0
3	薛平	510260广州医科大学附属第二医院肝胆胰外科	5	21	3.0	4.0
4	卢海武	510260广州医科大学附属第二医院肝胆胰外科	4	17	2.0	4.0
5	蒋小峰	510260广州医科大学附属第二医院肝胆胰外科	3	12	2.0	3.0
6	袁晓鹏	510260广州医科大学附属第二医院肝胆胰外科	1	0	0.0	0.0
7	张大伟	510260广州医科大学附属第二医院肝胆胰外科	1	0	0.0	0.0
8	刘颂航	510260广州医科大学附属第二医院肝胆胰外科	1	0	0.0	0.0