柑橘体细胞胚发生基因CsHB1特异肽段多克隆抗体的制备及其蛋白动态检测

• 作者: 战爽 程来超 葛晓霞 许全全 谢幸男 赖晓娜
• 来源期刊: 果树学报
• 学科: 农学
• 关键词: 柑橘 CsHB1 多克隆抗体 动态分析
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 种质资源·遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 1069-1075
• 页数: 7页
• 分类号: S666
• 语种: 中文
• DOI: 10.13925/j.cnki.gsxb.20170022

摘要

[目的]构建柑橘HD-ZIP Ⅱ转录因子CsHB1基因的原核表达系统,制备多克隆抗体,并检测抗体在‘伏令夏橙’胚性愈伤体胚诱导阶段中的特异性,为研究CsHB1基因在柑橘体细胞胚发生过程中的功能奠定基础.[方法]构建柑橘HD-ZIP Ⅱ转录因子CsHB1基因的原核表达载体pGEX4T-CsHB 1-N,转化大肠杆菌诱导目的融合蛋白的表达,并制备获得多克隆抗体anti-CsHB 1-N.通过Western blot检测抗体在原核表达系统和柑橘体细胞胚诱导阶段的特异性,并分析体细胞胚诱导阶段CsHB1蛋白水平表达的动态变化.[结果]重组原核表达载体pGEX4T-CsHB1-N在Esche-richia coli中高效表达出了分子质量约为49 ku的GST-CsHB 1-N融合蛋白,并纯化获得多克隆抗体anti-CsHB1-N;经过Western blot分析表明,多克隆抗体可与‘伏令夏橙’愈伤体胚诱导阶段表达的目的蛋白特异结合;蛋白表达结果分析表明,在胚性愈伤组织中CsHB1蛋白呈现高的表达量,随着诱导培养的进行,呈现了先下降后上升的波动变化.[结论]多克隆抗体特异性好,可与‘伏令夏橙’胚性愈伤组织中目的蛋白特异性结合,可用于CsHB1基因功能分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	葛晓霞		5	6	1.0	2.0
2	谢幸男		2	1	1.0	1.0
3	赖晓娜		1	0	0.0	0.0
4	战爽		1	0	0.0	0.0
5	程来超		1	0	0.0	0.0
6	许全全		1	0	0.0	0.0