天然生物活性N-酰基高丝氨酸内酯小分子抗原的化学合成及其抗体生成初探

• 作者: 付凯飞 吴成林 周丽君 李军 王欲晓
• 来源期刊: 转化医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: N-十二酰高丝氨酸内酯 半抗原衍生物 单抗
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 207-212,224
• 页数: 7页
• 分类号: R344
• 字数: 6740字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-3097.2017.04.004

摘要

目的 人工合成N-酰基高丝氨酸内酯(N-acylated homoserine lactones,N-aHSLs)完全抗原并制备相应单抗,建立N-aHSLs免疫检测的新方法及海洋弧菌N-aHSLs动态监测.方法 以月桂酸和高丝氨酸内酯为主要原料,通过多步系列化学反应人工合成N-十二酰高丝氨酸内酯(N-lauroyl-homoserine lactone,N-C12-HSL)及含羧基活性交联基团的半抗原衍生物12-羧基-N-十二酰高丝氨酸内酯(12-carboxyl-N-decanoyl-L-homoserine lactone,12-CD-LHL),用1H-磁共振、高压/效液相色谱仪和液相色谱-质谱联用方法确证合成产物的结构,并用生物感应法检测合成N-aHSLs的天然生物活性;用N-羟基琥珀酰亚胺活泼酯法将12-CD-LHL半抗原衍生物连接到载体蛋白;将N-C12-HSL人工完全抗原通过传统单抗制备技术,获得抗N-aHSLs杂交瘤细胞株,用酶联免疫吸附测定法鉴定其特异性和效价.结果 质谱、磁共振氢谱分析结果与理论预测相同,成功合成目标产物N-C12-HSL和12-CD-LHL半抗原衍生物;所合成的N-aHSLs能够分别激活生物感应菌株大肠杆菌MG4和紫色色杆菌026并使之显色;紫外吸收光谱扫描结果显示,半抗原已分别与牛血清白蛋白和卵清蛋白发生偶联,成功制备完全抗原;共获得3株抗N-C12-HSL单抗,均具有良好的免疫反应性.结论 N-aHSLs完全抗原和相应的单抗制备为N-aHSLs动态监测和后续研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李军	海军总医院中心科训科	95	341	9.0	13.0
2	周丽君	海军总医院中心实验科	37	90	5.0	7.0
3	王欲晓	海军总医院中心实验科	29	62	5.0	5.0
4	吴成林	海军总医院中心实验科	10	24	2.0	4.0
5	付凯飞	海军总医院中心实验科	15	26	3.0	4.0