缺氧微环境对宫颈癌Hela细胞HIF-1α及VEGF-A表达的影响

• 作者: 周铁军 杨瑶瑶 陈丽 龚莉
• 来源期刊: 泸州医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 缺氧诱导因子-1α VEGF-A 缺氧微环境 宫颈癌 二氯化钴
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 123-127
• 页数: 5页
• 分类号: R730|R737.31
• 字数: 3688字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2096-3351.2017.02.006

摘要

目的:研究在缺氧微环境下人宫颈癌Hela细胞中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子A(VEGF-A)的表达.方法:采用CoCl2构建Hela细胞体外缺氧微环境模型,使用CCK8法来检测细胞的增殖;使用实时荧光定量PCR法分别来检测HIF-1α和VEGF-A mRNA表达的变化;免疫细胞化学技术检测HIF-1α和VEGF-A蛋白的表达.结果:CCK8检测结果发现,CoCl2诱导的缺氧微环境能降低Hela细胞的增殖活性,随着CoCl2浓度的增加其增殖活性逐渐降低,在150μmol/L时降到最低,各浓度组间总体差异有统计学意义(F=10.118,P=0.001,P<0.05),在相同CoCl2浓度构建的缺氧微环境中,随着缺氧时间的延长,其细胞增殖活性逐渐降低,在12 h降至最低,而后增殖活性增加,各时间组总体差异有统计学意义(F=9.727,P=0.002,P<0.005).实时荧光定量PCR结果发现同对照组比较,缺氧处理3 h,HIF-1α和VEGF-A的mRNA表达无明显差异(P=0.86,P=0.72,P>0.05);随着缺氧时间增加,HIF-1α的mRNA表达在12 h时达峰值,随后下降,各时间组比较差异有统计学意义(F=1.627,P<0.001).VEGF-A mRNA表达随着缺氧时间的增加逐渐增加,各时间组比较差异有统计学意义(F=7.407,P<0.001).HIF-1α和VEGF-A在mRNA表达水平上无相关性(r=0.647,P>0.05);免疫细胞化学检测发现,在150μmol/LCoCl2构建的缺氧微环境下,随着时间延长HIF-1α蛋白表达逐渐增加,在12 h达到峰值,而后下降(F=100.930,P<0.001);VEGF的蛋白表达随时间延长而逐渐增加(F=118.336,P<0.001).HIF-1α和VEGF-A在蛋白表达水平上呈正相关(r=0.892,P<0.05).结论:CoCl2诱导的缺氧微环境能使Hela细胞中HIF-1α的表达,促进其下游靶基因VEGF-A在mRNA及蛋白水平表达升高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈丽	西南医科大学附属医院病理科	24	57	3.0	7.0
2	周铁军	西南医科大学附属医院病理科	17	29	3.0	4.0
3	龚莉	西南医科大学附属医院病理科	6	12	2.0	3.0
4	杨瑶瑶	西南医科大学附属医院病理科	3	11	2.0	3.0