金乌贼肌肉中三甲胺脱甲基酶的分离纯化及酶学性质

• 作者: 宋正规 张洪超 朱仁义 李和生 步婷婷 薛张芝 金洋
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 金乌贼 肌肉 三甲胺脱甲基酶 纯化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 页码范围: 845-853
• 页数: 9页
• 分类号: S912|TS254.1
• 字数: 5225字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20161210642

摘要

为了提取纯化金乌贼肌肉中的三甲胺脱甲基酶(TMAOase),本研究采用含有0.1 mol/L NaCl、pH 7.0、浓度为20 mmol/L的三羟甲基氨基甲烷(Tris)-醋酸缓冲液提取粗酶液,经透析、浓缩处理后,通过DEAE-52阴离子交换柱层析和Sephacryl S-300柱层析得到了纯化的TMAOase,并对其酶学性质进行了研究.结果显示,经Sephacryl S-300柱层析的TMAOase相比粗酶纯化了209.54倍;粗酶和纯化酶的最适温度分别为55和50℃,当温度高于最适温度时,酶活性开始出现显著下降,粗酶在80℃仍残留21.9%的活性;而纯化酶在80℃时,几乎检测不到酶活;粗酶和纯化酶的最适pH均为7.0,中性条件下表现稳定,在酸性和碱性条件下稳定性下降,pH为9.0时,粗酶残留60.7%的活性,而纯化酶的活性仅为20.5%.以双倒数作图法(Lineweaver-Burk法)测得纯化的TMAOase的Km值为22.8 mmol/L;经SDS-PAGE电泳分析,测得其分子量为21.3 ku;在化学物质中,柠檬酸和CaCl2对酶活性具有显著的促进作用,H2O2和Na2S对TMAOase活性有显著抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李和生	宁波大学海洋学院	91	1127	18.0	29.0
2	步婷婷	宁波大学海洋学院	6	49	5.0	6.0
3	金洋	宁波大学海洋学院	12	56	5.0	6.0
4	宋正规	宁波大学海洋学院	11	52	5.0	6.0
5	薛张芝	宁波大学海洋学院	11	30	4.0	5.0
6	张洪超	宁波大学海洋学院	11	30	4.0	5.0
7	朱仁义	宁波大学海洋学院	3	11	3.0	3.0