HSP90抑制剂根赤壳菌素对斑马鱼胚胎发育的影响

• 作者: 倪国军 刘玮 张俊芳 李艳 罗军涛 陶筱帆 韩兵社
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 斑马鱼 热休克蛋白90 根赤壳菌素 色素沉积 发育
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 988-994
• 页数: 7页
• 分类号: S917
• 字数: 4762字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2017.17151

摘要

为研究热休克蛋白90(heat shock protein 90,HSP90)在斑马鱼(Danio rerio)胚胎发育中的作用,本实验采用2 μmol/L、5μmol/L、10 μmol/L的HSP90抑制剂根赤壳菌素(radicicol)对斑马鱼发育期胚胎进行处理,监测斑马鱼胚胎不同发育时期两个HSP90功能抑制标志基因BAG3 (BCL2-associated athanogene3)和HSPB1(heat shock proteinbeta-1)的mRNA的表达水平,并观察不同发育时期的胚胎发育状况.结果如下:(1)实时荧光定量PCR结果显示,BAG3和HSPB1 mRNA水平在根赤壳菌素处理胚胎12 hpf (hours post-fertilization,hpf)或24 hpf后显著增高,Western blot检测到5 μmol/L根赤壳菌素处理胚胎24 hpf后HSP70表达上调,证明该实验条件下HSP90功能受到抑制;(2)根赤壳菌素处理后斑马鱼胚胎发育变缓,胚胎成活率统计显示:2 μmol/L、5 μmol/L、10 μmol/L根赤壳菌素处理24 hpf胚胎成活率分别是95％、77％、35％,成活率随根赤壳菌素浓度的增高而降低;(3)5 μmol/L根赤壳菌素处理72 hpf可见部分个体色素沉积减少、心包膜增大、肌肉萎缩等发育畸形.研究结果证明HSP90在斑马鱼胚胎发育过程中发挥重要的作用,根赤壳菌素在5 μmol/L时已达到较佳抑制效果且成活率较高,而且胚胎发育出现了各种形态学变化,为后期研究HSP90调节斑马鱼胚胎发育奠定了基础.