淇河鲫IL-8原核表达系统的构建及多克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 卢荣华 王俊丽 聂国兴 陈金顶 雒燕婷
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 淇河鲫 白细胞介素-8 原核表达系统 多克隆抗体 组织表达 免疫组化
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 970-976
• 页数: 7页
• 分类号: S917
• 字数: 4702字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2017.16343

摘要

为揭示淇河鲫(Carassius auratus var.Qihe)白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)的功能,本研究构建了原核表达系统,并制备了兔抗鲫IL-8多克隆抗体.首先采用RT-PCR法扩增淇河鲫IL-8基因编码序列中不含信号肽的基因片段,克隆到pET-32a(+)载体后转化入Rosetta菌株构建原核表达系统.经IPTG诱导表达出相对分子质量约27.8 kD的目标融合蛋白.将纯化的融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,效价达1:105.经免疫亲和层析纯化的抗体能特异性识别重组和天然的淇河鲫IL-8蛋白.比较不同组织的免疫组化和荧光定量PCR结果,IL-8蛋白量和mRNA的表达量在不同组织间变化趋势一致,在肌肉、脾和头肾均检测到较高的表达量,肠道的表达量较低.本研究为进一步探讨淇河鲫IL-8的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	聂国兴	河南师范大学水产学院	165	1275	18.0	30.0
3	王俊丽	华南农业大学兽医学院	44	518	12.0	21.0
5	陈金顶	华南农业大学兽医学院	58	491	10.0	21.0
6	卢荣华	河南师范大学水产学院	28	58	5.0	7.0
8	雒燕婷	河南师范大学生命科学学院	3	6	2.0	2.0