沉默Gli2基因对肝癌SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响

• 作者: 严舒 兰川 吴斌 张光年 曾丽娟 李建水 石刚
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胶质瘤相关癌基因同源蛋白2基因 肝癌 细胞增殖 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1260-1265
• 页数: 6页
• 分类号: R735.7|R730.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385x.2017.11.003

摘要

目的:探讨沉默胶质瘤相关癌基因同源蛋白2基因(glioma associated oncogene homolog 2,Gli2)对肝癌SMMC-7721细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制.方法:以重组shRNA-Gli2慢病毒感染SMMC-7721细胞,筛选沉默效果最佳干扰序列.以携最佳干扰序列重组慢病毒感染SMMC-7721细胞为干扰组,shRNA-NC慢病毒感染SMMC-7721细胞为对照组,不作处理SMMC-7721细胞为空白组.采用CCK-8法与集落形成实验检测各组细胞的增殖活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡率;用qPCR和Western blotting法检测各组细胞Gli2、cyclinD1、Bax和Bcl-2 mRNA及其蛋白质的表达.结果:重组慢病毒感染率约为90％,重组shRNA-Gli2-1慢病毒沉默效果最佳;干扰组SMMC-7721细胞Gli2 mRNA和蛋白质表达显著低于对照组与空白组(均P＜0.05),而对照组与空白组之间Gli2 mRNA和蛋白质表达差异不显著(P＞0.05).干扰组SMMC-7721细胞的增殖和细胞集落形成数明显少于对照组和空白组(均P＜0.05);干扰组SMMC-7721细胞凋亡率显著高于对照组和空白组(均P＜0.01);干扰组SMMC-7721细胞cyclinD1及Bax mRNA和蛋白质表达显著低于对照组和空白组,而Bcl-2 mRNA和蛋白质表达则显著高于对照组和空白组(均P＜0.05).结论:沉默Gli2基因的表达能够抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖,促进肝癌细胞凋亡,其机制可能与cyclinD1、Bax的下调和Bcl-2上调有关.