低温肉制品中3种食源性致病菌多重聚合酶链式反应快速检测方法的建立

• 作者: 徐宝才 方伶俐 李新福 李聪 王周平 赵颖
• 来源期刊: 肉类研究
• 学科: 工学
• 关键词: 低温肉制品 多重PCR 快速检测 食源性致病菌
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 45-50
• 页数: 6页
• 分类号: TS251.7
• 字数: 4853字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/rlyj1001-8123-201702009

摘要

针对低温肉制品中较易污染的沙门氏菌(Salmonella spp.)、单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)等有害微生物,利用多重聚合酶链式反应(multiplex polymerase chainreaction,m-PCR)的方法,对3种菌同时快速检测,从而达到节省时间,提高效率的目的.使用沙门氏菌的invA基因、金黄色葡萄球菌的Prf4基因和单增李斯特菌nuc基因设计3对特异性引物,在确定特异性引物的基础上,将3种菌进行培养增菌后接种于低温肉制品中,过夜富集后收集并进行灵敏度检测,优化多重PCR反应体系并应用于实际样品的检测.结果表明:多重PCR方法在同时检测这3种有害微生物时,m-PCR最佳反应条件如下:25 μL反应体系、10×PCR缓冲液2.5 μL、2.5 mmol/L dNTPs 2.0 μL、2.5 U/μL的DNA聚合酶0.5 μL及上、下游引物各0.5 μL、单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌的模板1.0 μL、沙门氏菌的模板2.0 μL,加ddH2O补足至25μL,最佳退火温度为64℃.多重PCR快速检测方法适用于低温肉制品中沙门氏菌等3种食源性致病菌的检测,具有快速、灵敏、特异、简便等特点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王周平	江南大学食品学院	58	379	10.0	16.0
2	李新福	江南大学食品学院	1	8	1.0	1.0
6	李聪	江南大学食品学院	10	21	3.0	4.0
10	方伶俐	江南大学食品学院	1	8	1.0	1.0
11	赵颖	江苏雨润肉食品有限公司肉品加工与质量控制国家重点实验室	1	8	1.0	1.0
12	徐宝才	江南大学食品学院	12	309	8.0	12.0