消化时间对兔纤维环细胞生物学特性影响的实验研究

• 作者: 冯刚 刘康 向小聪 杨飞 肖东琴 邓丽
• 来源期刊: 西部医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 纤维环细胞 细胞培养 Ⅱ型胶原酶 生物学特性
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 163-167
• 页数: 5页
• 分类号: Q-331
• 字数: 3835字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3511.2017.02.004

摘要

目的 探索兔纤维环细胞分离培养的最佳消化时间及不同消化时间对细胞生物特性的影响.方法 将20只新西兰大白兔随机均分为A、B、C、D、E组,空气栓死并取其纤维环组织,采用胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶序贯消化法分离纤维环细胞,A、B、C、D、E组Ⅱ型胶原酶消化的时间分别为1、2、3、4、5h,获取的细胞用DMEM培养基进行培养.通过比较各组获取的原代细胞数量、细胞存活率,以及第3代细胞在形态、细胞外基质表达情况等方面的差异.结果 随着消化时间的增加,获取的原代细胞数目越多,C、D、E组均可获得较理想的细胞数量,但E组细胞出现贴壁不良.5组第3代细胞甲苯胺蓝异染性、Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原免疫染色均呈阳性,但C、D组较其他三组着色更深.结论 用序贯消化法分离培养兔纤维环细胞,Ⅱ型胶原酶的最佳消化时间为3～4 h.