抑制叉头状转录因子O1表达可促进人胚胎干细胞向胰岛素分泌细胞分化

• 作者: 于菲 杨进 洪天配 魏蕊
• 来源期刊: 中华糖尿病杂志
• 关键词: 叉头转录因子类 胚胎干细胞 胰岛
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 758-763
• 页数: 6页
• 字数: 4929字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-5809.2017.12.006

摘要

目的 探讨叉头状转录因子O1(FoxO1)对人胚胎干细胞(hESCs)定向分化为胰岛素分泌细胞(IPCs)的调控作用.方法 体外诱导hESCs定向分化为IPCs,应用定量聚合酶链反应(PCR)和Western blotting分析FoxO1的动态表达,采用定量PCR检测八聚体结合转录因子4(Oct4)、叉头转录因子a2(Foxa2)、胰十二指肠同源盒因子1(Pdx1)及胰岛素表达的动态变化.在分化第3阶段细胞(胰腺前体细胞)中通过慢病毒感染敲减或过表达FoxO1,应用定量PCR检测胰腺前体细胞Foxa2、Pdx1及胰岛素的表达;利用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌.两组数据的比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析.结果 在hESCs定向分化为IPCs的五个阶段中,FoxO1 mRNA和蛋白水平可见持续稳定表达;Oct4表达水平随着分化进程呈显著进行性降低;Foxa2表达水平呈先升后降的趋势,在分化第3阶段达到高峰;Pdx1和胰岛素表达水平随着分化进程逐渐升高.与相应的对照组相比,敲减FoxO1可显著上调胰腺前体细胞中Foxa2(4.31±0.74比1.00± 0.34,t=7.08,P<0.01)、Pdx1(2.91±0.24比1.00±0.15,t=11.62,P<0.01)及胰岛素mRNA(2.60±0.25比1.00±0.12,t=10.08,P<0.01)表达水平,过表达FoxO1可显著下调胰岛素mRNA表达(0.81±0.07比1.00± 0.03,t=4.19,P<0.05),而对Foxa2和Pdx1的mRNA表达未有显著影响.此外,敲减FoxO1既可增加低糖(2 mmol/L葡萄糖)状态下的胰岛素分泌(7.53±2.02比1.00±0.05,t=3.23,P<0.05),又可促进高糖(20 mmol/L葡萄糖)刺激下的胰岛素分泌(17.39±3.04比6.45±1.34,t=3.30,P<0.05);而过表达FoxO1对低糖状态下的胰岛素分泌无明显影响,但可抑制高糖刺激下的胰岛素分泌(2.02±0.50比4.85±1.42, t=2.61,P<0.05),从而使细胞丢失对葡萄糖的反应性.结论 FoxO1在hESCs定向分化为IPCs的过程中发挥负性调控作用,抑制FoxO1表达可能是促进IPCs分化成熟的一种潜在策略.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	洪天配	北京大学第三医院内分泌科	210	1216	17.0	26.0
2	魏蕊	北京大学第三医院内分泌科	39	102	7.0	9.0
3	杨进	北京大学第三医院内分泌科	35	120	7.0	10.0
4	于菲	北京大学第三医院内分泌科	6	33	3.0	5.0