烟草碱法提取基因组DNA的改进

• 作者: 孔英珍 徐宗昌 王萌
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 烟草 DNA提取 碱裂解 PCR 转基因检测
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 59-65
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017.02.009

摘要

为能够快速高效的对大量转基因烟草样品进行DNA提取,对碱法提取烟草组织DNA的方法进行了改进.采用0.01mol/L的NaOH溶液为提取液,破碎转基因烟草叶片组织后无需经过加热煮沸中和等步骤,上清液可直接用作PCR反应的模板.结果表明,0.01-0.1 mol/L之间的NaOH溶液制备的DNA模板均能成功扩增,该方法制备的DNA模板不依赖特殊的反应条件,多种品牌的PCR Mix均能成功进行扩增反应.与传统SDS提取法和试剂盒提取法获得的DNA相比,PCR结果没有明显差异.此提取方法在小麦、高粱、水稻、玉米等作物上也取得了很好的实验效果.通过本方法制备的DNA模板,其PCR扩增的产物可直接用来测序分析.该方法使用仪器少,样品消耗少,快速、简便、成本低,没有交叉污染,能够在短时间内处理大量样品,因此能够对大量的转基因烟草样品进行DNA的快速提取和鉴定.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王萌	中国农业科学院烟草研究所中国农业科学院烟草遗传改良与生物技术重点开放实验室	34	171	8.0	12.0
5	孔英珍	中国农业科学院烟草研究所中国农业科学院烟草遗传改良与生物技术重点开放实验室	6	21	3.0	4.0
6	徐宗昌	中国农业科学院烟草研究所中国农业科学院烟草遗传改良与生物技术重点开放实验室	4	17	3.0	4.0