猪流行性腹泻病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立

• 作者: 吴学敏 周伦江 王晨燕 王隆柏 车勇良 陈如敬
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流行性腹泻病毒 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 823-827
• 页数: 5页
• 分类号: S767.5
• 字数: 3921字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19303/j.issn.1008-0384.2017.08.003

摘要

采用特异性好的鼠源抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)单克隆抗体为捕获抗体,兔源多克隆抗体为检测抗体,建立PEDV双抗体夹心ELISA检测方法.结果显示,该方法的最佳反应条件为:抗PEDV单克隆抗体E1包被质量浓度4.40 μg·mL-1,37℃包被2h,采用5％BSA封闭液封闭1h,兔抗PEDV抗体工作质量浓度为5.91μg·mL-1,酶标二抗稀释度为1∶2000,以OD450nm≥0.381作为阳性判定标准.该ELISA方法对猪轮状病毒和猪传染性胃肠炎病毒无交叉反应.敏感度可达30μg·mL-1(5×103.12);重复性变异系数小于10％.采用该方法和RT-PCR方法同时检测临床样品42份,阳性样品符合率为92.30％,表明建立的PEDV双抗体夹心ELISA检测方法具有特异性好、敏感性高和方便快捷等优点,可用于PEDV快速检测.