硫氧还蛋白还原酶抑制剂乙烷硒啉逆转顺铂耐药及其机制研究

• 来源期刊: 浙江大学学报（英文版）（B辑：生物医学和生物技术）
• 学科: 医学
• 关键词: 乙烷硒啉 顺铂耐药 K562 凋亡 Bcl-2
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 页码范围: 373-382
• 页数: 10页
• 分类号: R9
• 语种: 英文

摘要

目的:研究凋亡调控相关蛋白来了解顺铂耐药成因,同时考察乙烷硒啉(Ethaselen)在K562耐药细胞中逆转顺铂耐药的作用,并初步探讨其作用机制.创新点:首次研究乙烷硒啉在逆转顺铂耐药中的作用,且此作用与乙烷硒啉诱导细胞凋亡相关.方法:通过长时间脉冲诱导得到顺铂耐药K562细胞,并观察耐药细胞形态及倍增时间.采用MTT法考察乙烷硒啉、顺铂及其联用组在不同细胞株间的生长抑制作用.流式细胞术分析细胞凋亡情况以及细胞内活性氧(ROS)水平.最后,通过蛋白质免疫印迹(Western blot)考察凋亡调控相关蛋白水平的变化.结论:脉冲诱导得到的K562耐药细胞对顺铂的耐受性是原K562细胞的5.34倍.形态学观察发现,耐药细胞体积增大,粘附性进一步降低.乙烷硒啉与顺铂联用表现出协同效应.当加入少量的乙烷硒啉(顺铂与乙烷硒啉的摩尔比率为10:1),顺铂作用K562耐药细胞的半抑制浓度(IC50)值可以减少21倍.流式细胞术及Western blot表明,乙烷硒啉能够诱导耐药细胞凋亡.其逆转顺铂耐药主要是通过调控Bcl-2及Bax蛋白比例以及通过提高细胞内活性氧水平引起线粒体通透转运孔道(PTP)蛋白孔道的形成来促使释放细胞色素c,进而引起Caspase凋亡途径.