非酒精性脂肪肝大鼠原代肝细胞的分离与鉴定

• 作者: 彭孟云 朱晓宁 杨香香 汪静
• 来源期刊: 四川医学
• 学科: 医学
• 关键词: 非酒精性脂肪肝 原代肝细胞 分离 鉴定
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 基金论文
• 页码范围: 21-24
• 页数: 4页
• 分类号: R-332
• 字数: 4251字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16252/j.cnki.issn1004-0501-2017.01.007

摘要

目的 构建一种简便、稳定、高效的NAFLD大鼠原代肝细胞分离、培养方法.方法 20只雄性SD大鼠随机分为对照组和模型组,分别饲以普通饲料和高脂饲料,10周后采用HE染色及油红O染色观察肝组织病理变化.采用含EDTA的buffer I和含0.03%IV型胶原酶的buffer II在体原位灌注肝脏,低速离心及48%percoll细胞分离、纯化肝细胞,0.4%Typan blue染色鉴定肝细胞活性,倒置相差显微镜及和CK-18免疫荧光鉴定肝细胞的形态及性质;TG测定试剂盒检测两组原代肝细胞内甘油三酯(TG)的含量.结果 HE染色及油红O染色:与对照组相比,模型组大鼠肝细胞脂肪变性明显,NAFLD大鼠造模成功;NAFLD大鼠可获得肝细胞约(1~1.5)×108个/只,0.4%Typan blue染色鉴定细胞活性≥92%,细胞呈典型的肝细胞形态,CK-18表达阳性,细胞纯度≥98%;与正常组原代肝细胞相比,模型组原代肝细胞TG含量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 改良的在体原位两步灌注消化法可获得大量高活性、高纯度且具备NAFLD基本代谢功能的原代肝细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪静	西南医科大学附属中医医院肝胆病科	44	70	5.0	6.0
2	朱晓宁	西南医科大学附属中医医院肝胆病科	23	44	4.0	5.0
3	彭孟云	西南医科大学附属中医医院肝胆病科	11	16	3.0	4.0
4	杨香香	西南医科大学附属中医医院肝胆病科	3	3	1.0	1.0