FSHβ锚定的外泌体制备及其对卵巢癌细胞诱导杀伤作用

• 作者: 周希 岳艳 李进 王小波 黄光荣
• 来源期刊: 中国妇幼健康研究
• 关键词: 卵巢癌 外泌体 卵泡刺激素受体β 抗肿瘤
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 1601-1605
• 页数: 5页
• 分类号: R737.31
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5293.2017.12.031

摘要

目的 探讨分析卵泡刺激素受体-β(FSHβ)锚定的外泌体(exosomes,Ex)制备及其对卵巢癌细胞诱导杀伤作用.方法 构建pDisplay-FSH重组质粒并制备exosomes,检测exosomes的形态及相关蛋白分子表达情况.通过混合淋巴细胞实验和肿瘤细胞毒性实验,观察Ex/FSHβ 对T细胞的诱导增殖及对卵巢癌细胞的杀伤作用.结果 成功构建重组质粒pDisplay-FSHβ 并稳定转染至HEK293细胞.经磷酸腺肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)洗脱后,HEK293-FSHβ 组洗脱液中FSHβ 水平显著高于HEK293组 、HEK293-N1组(t值分别为17.221、19.583,均P<0.05).蛋白免疫印迹法检测显示,Ex/FSHβ 组黏附分子1(ICAM-1)、CD86及人类白细胞抗原-DR(HLA-DR)相对表达量与Ex/N1组 、Ex组比较,差异有统计学意义(t=5.147～7.886,均P<0.05).树突状细胞(DC)-Ex/FSHβ 组T细胞增殖指数与DC-Ex/N1组 、DC-Ex组及DC组比较,差异有统计学意义(t值分别为8.634、9.773、11.264,均P<0.05).效靶比在60:1时,DC-Ex/FSHβ 组杀伤率最高.效靶比在60:1时,DC-Ex/FSHβ 组干扰素-γ(INF-γ)水平 、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量与DC-Ex/N1组 、DC-Ex组及DC组比较,差异均有统计学意义(t=17.627～39.854,均P<0.05).迁移实验显示,DC-Ex/FSHβ 组细胞穿过聚碳质膜微孔的细胞数显著低于DC-Ex/N1组 、DC-Ex组及DC组(t值分别为17.396、16.517、34.892,均P<0.05).结论 基因重组技术可将FSHβ 锚定到HEK293细胞来源的exosomes上,DC-Ex/FSHβ 能够诱导细胞毒性T细胞对卵巢癌细胞产生较强的诱导杀伤作用,这一作用为临床以exosomes为基础的肿瘤免疫治疗提供了一定的理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	岳艳	湖北医药学院附属人民医院妇科	25	225	8.0	14.0
2	黄光荣	湖北医药学院附属人民医院妇科	25	90	5.0	8.0
3	周希	湖北医药学院附属人民医院妇科	3	5	1.0	2.0
4	王小波		7	42	3.0	6.0
5	李进	湖北随州市中心医院生殖医学科	1	1	1.0	1.0