棉花转甲基酶基因GhBSMT1的克隆、原核表达及表达谱分析

• 作者: 井维霞 刘丹凤 寇俊凤 张强 张永军 曲爱军 郭予元 黄欣蒸
• 来源期刊: 中国生物防治学报
• 学科: 农学
• 关键词: 陆地棉 苯甲酸/水杨酸羧基甲基转移酶 序列特征 原核表达 组织表达谱
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 463-471
• 页数: 9页
• 分类号: S435.62
• 字数: 4826字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16409/j.cnki.2095-039x.2017.04.005

摘要

采用RT-PCR结合RACE技术从陆地棉中棉所12中克隆得到全长为1280 bp的苯甲酸/水杨酸羧基甲基转移酶基因序列,命名为GhBSMT1.预测该转移酶分子量40.8 kD,等电点6.12,为不稳定的亲水蛋白.通过原核表达获得大小约41 kD的可溶性重组目标蛋白.利用实时荧光定量PCR技术检测了棉花中GhBSMT1在植物激素处理和棉铃虫取食后表达转录情况,发现GhBSMT1在棉花的根、茎和叶中均有表达.水杨酸甲酯(MeSA)处理能够引起GhBSMT1下调表达,而茉莉酸甲酯(MeJA)处理对靶标基因影响不显著.另外,棉铃虫取食棉株6h或48h后,GhBSMT1表达量显著降低.结果表明,GhBSMT1在棉花各组织均有分布并受外源MeSA调控,该基因的表达还被棉铃虫取食抑制.