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摘要:
目的:探索下调T细胞因子3( TCF3)抑制非小细胞肺癌细胞增殖和迁移的分子机制。方法:运用Lipofectamine 2000转染法将siTCF3和阴性对照siRNA ( NCsiRNA )转染非小细胞肺癌A549和H1299细胞;运用real-time PCR和Western blot分别测定TCF3的mRNA和蛋白水平;运用萤光素酶报告基因实验测定TCF3的转录活性;MTT、克隆形成实验、Transwell实验和Annexin V-FITC/PI染色联合流式细胞术分别测定细胞的活力、克隆形成能力、转移能力及细胞凋亡率;Western blot检测Wnt、c-Myc、基质金属蛋白酶( MMP)-9、MMP-13、金属蛋白酶组织抑制物( TIMP)-1的蛋白表达水平。结果:与NCsiRNA转染组的细胞比较,siTCF3显著抑制A549细胞和H1299细胞中TCF3的mRNA和蛋白水平( P<0.01)。 TCF3转录活性和c-Myc蛋白表达水平明显低于NCsiRNA细胞(P<0.05)。 MTT实验结果显示,培养24 h、48 h、72 h和96 h的A549-siTCF3和H1299-siTCF3细胞活力均显著低于NCsiRNA细胞(P<0.05)。与NCsiRNA细胞相比,siTCF3显著抑制A549细胞和H1299细胞的克隆形成能力(P<0.01)。 Transwell实验结果显示A549-siTCF3和H1299-siTCF3细胞迁移数显著低于A549-NCsiRNA和H1299-NCsiRNA组细胞( P<0.05)。流式细胞术分析结果显示A549-siTCF3细胞和H1299-siTCF3细胞的凋亡率显著高于A549-NCsiRNA和H1299-NCsiRNA细胞(P<0.01)。 Western blot实验结果显示,下调TCF3表达能抑制Wnt蛋白的表达,MMP-9和MMP-13的蛋白表达明显降低,TIMP-1的蛋白表达增高。结论:siTCF3显著抑制A549细胞和H1299细胞的增殖和迁移能力,并诱导细胞凋亡,其分子机制可能通过下调Wnt通路活性以及调控MMP家族关键成员的表达而实现。
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篇名 下调TCF3抑制非小细胞肺癌细胞的增殖和迁移能力
来源期刊 中国病理生理杂志 学科 医学
关键词 非小细胞肺癌 T细胞因子3 基质金属蛋白酶
年,卷(期) 2017,(2) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 289-296
页数 8页 分类号 R730.23
字数 4819字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1000-4718.2017.02.016
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1 王士猛 山东省菏泽市立医院胸外科 1 5 1.0 1.0
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中国病理生理杂志
月刊
1000-4718
44-1187/R
大16开
广东省广州市黄埔大道西601号
46-98
1985
chi
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