柞蚕传染性软腐病病毒2C蛋白的表达纯化和酶活性分析

• 作者: 李文利 王乃红 耿鹏
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 柞蚕 传染性软腐病病毒 2C蛋白 解旋酶 三磷酸核苷酶
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 253-259
• 页数: 7页
• 分类号: S885.1|S884.5+9|Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.13441/j.cnki.cykx.2017.02.011

摘要

柞蚕传染性软腐病病毒是从感染吐白水软化病的柞蚕体内分离的一株小RNA病毒,属于软腐病病毒属(Iflavirus),含解旋酶结构域的2C蛋白是该病毒的功能蛋白质之一.以感染柞蚕软腐病病毒的柞蚕蛹cDNA为模板,PCR获得2C蛋白的编码基因,并利用Bac-to-Bac表达系统构建重组杆粒pFastBac-Dual-GFP-Hel 2C,在昆虫细胞Sf9中表达了该病毒的2C蛋白.对重组2C蛋白的三磷酸核苷水解酶(NTPase)活性和解旋酶活性进行检测的结果显示:重组2C蛋白具有NTPase活性,能够水解4种NTP,并且具有解旋酶活性,能够解旋3'端至5'端方向单链突出的双链DNA.初步推测2C蛋白在柞蚕传染性软腐病病毒复制中发挥水解三磷酸核苷和解旋DNA链的作用.