成年小鼠心脏成纤维细胞的分离、纯化和原代培养

• 作者: 张振刚 李如君 龚开政
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 成年小鼠 心脏成纤维细胞 原代培养 细胞鉴定
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 67-71
• 页数: 5页
• 分类号: Q813.1+1|R392-33|Q253
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨并建立成年小鼠心脏成纤维细胞原代培养方法.方法 采用0.8 g/LⅣ型胶原蛋白酶和1 g/L胰蛋白酶为消化液,以多次短时间水浴振荡的方式消化成年小鼠心脏组织,差速贴壁法分离纯化心脏成纤维细胞.波形蛋白免疫荧光细胞化学染色法鉴定细胞类型及纯度;倒置相差显微镜观察细胞生长情况,绘制细胞生长曲线;CCK-8法测定细胞增殖能力、Western blot法检测转化生长因子β1(TGF-β1)刺激后细胞SMAD家族成员2/3(Smad2/3)蛋白及磷酸化水平.结果 差速贴壁后在相差显微镜下可见大量球形贴壁细胞;3d后细胞逐渐由圆形伸展为长梭形并迅速增殖,分裂象多见;5d后细胞数量显著增多,完全汇合无空隙;细胞生长曲线近似“S”形.波形蛋白阳性率可达95％.CCK-8法显示在第3～5天细胞增殖能力最显著,给予第2代心脏成纤维细胞TGF-β1刺激显示Smad2/3蛋白磷酸化水平明显增加.结论 建立了一种快速、经济、有效获取成年小鼠心脏成纤维细胞的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张振刚	扬州大学第二临床医学院心血管内科	49	322	9.0	16.0
2	龚开政	扬州大学第二临床医学院心血管内科	41	149	7.0	10.0
3	李如君	扬州大学第二临床医学院心血管内科	4	13	2.0	3.0