蓝光诱导人视网膜色素上皮细胞分泌外泌体与核苷酸结合寡聚化结构样受体蛋白炎性体的相关性研究

• 作者: 何广辉 姜鉴洪 宋建 杨婧 陈松 陈莉 马映雪
• 来源期刊: 中华眼底病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 视网膜色素上皮/病理生理学 外泌体 炎性体 光刺激/副作用
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 498-502
• 页数: 5页
• 分类号: R774.1
• 字数: 4631字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1005-1015.2017.05.014

摘要

目的 观察蓝光诱导人视网膜色素上皮(RPE)细胞外泌体对核苷酸结合寡聚化结构样受体蛋白(NLRP3)炎性体相关因子表达的影响.方法 人RPE细胞株贴壁细胞分为实验组和对照组.实验组细胞以蓝光照射6 h建立光损伤模型;对照组细胞常规培养.分级低温超速离心法获得两组细胞外泌体,透射电子显微镜观察其形态;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测两组细胞外泌体表面CD63及白细胞介素(IL)-1β、IL-18、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-1)蛋白相对表达水平.将两组细胞外泌体作用于正常RPE细胞,据此分为蓝光诱导细胞外泌体+实验组、正常细胞外泌体+对照组.培养24 h后,Western blot检测两组细胞外泌体中IL-1β、IL-18、caspase-1蛋白表达;荧光实时定量聚合酶链反应检测两组细胞中NLRP3 mRNA表达.结果 实验组细胞发生损伤失去原有形态;外泌体均呈双凹托盘状,直径50~200 nm;实验组细胞外泌体中IL-1β(t=18.04)、IL-18(t=12.55)、caspase-1(t=14.70)蛋白表达量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001).蓝光诱导细胞外泌体+实验组细胞外泌体中IL-1β(t=18.59)、IL-18(t=23.95)、caspase-1(t=35.27)蛋白表达量明显高于正常细胞外泌体+对照组,差异均有统计学意义(P<0.001);蓝光诱导细胞外泌体+实验组、正常细胞外泌体+对照组细胞内NLRP3 mRNA相对表达量分别为1.000±0.069、0.200±0.010,两者比较,差异有统计学意义(t=12.20,P<0.001).结论 蓝光诱导RPE细胞外泌体可使RPE细胞内NLRP3炎性体相关细胞因子IL-1β、IL-18、caspase-1蛋白和NLRP3 mRNA表达上调.