一种基于无缝克隆构建重组杆状病毒的方法

• 作者: 何玉龙 史翠萍 郝雪敏 钱月忠 陈健 陈琴
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 无缝克隆 线性化 重组杆状病毒 复制缺陷 重组拯救
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 275-281
• 页数: 7页
• 分类号: Q939.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.13441/j.cnki.cykx.2017.02.014

摘要

一些病毒复制过程涉及到断裂双链DNA的修复,主要有同源重组和非同源的末端连接2种修复形式.基于这种修复机制建立了构建重组杆状病毒的无缝克隆方法,采用该方法构建重组病毒的2个主要元件是:线性化的复制缺陷型杆状病毒载体和重组拯救DNA片段.杆状病毒载体经Bsu36 Ⅰ酶切后产生2个末端,即切短了的orf1629 3'末端和细菌人工染色体(BAC)末端.其中,含克隆目的基因的重组拯救DNA片段通过同源臂同源重组修复病毒载体orf1629缺失的3'端序列,并通过细胞内的非同源末端连接修复细菌人工染色体片段(BAC)Kanr末端,从而使载体环化产生重组杆状病毒.应用该方法构建重组杆状病毒无需构建重组载体,无需进行重组后筛选,具有成本低、效率高的特点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈琴		4	0	0.0	0.0
2	钱月忠		4	2	1.0	1.0
3	陈健		22	54	5.0	7.0
4	何玉龙		11	0	0.0	0.0
5	史翠萍		4	2	1.0	1.0
6	郝雪敏		2	0	0.0	0.0